محیط کشت پایه آبگوشت غنی شده لیستریا بافر

پایه آبگوشت غنی شده لیستریا بافر:

لیستریا منوسایتوژنز تنها گونه ای از جنس لیستریا است که گاهی اوقات باعث ایجاد لیستریوز در انسان می شود.L. seeligeri، L. welshimeri و L. ivanovii با بیماری های انسانی مرتبط هستند. میکروبیولوژیک و اپیدمیولوژیک شواهد از موارد پراکنده و همه گیر لیستریوز نشان می دهد که راه اصلی انتقال از طریق مصرف مواد غذایی آلوده به L. monocytogenes می باشد.
L. مونوسیتوژنز به دلیل عوارض بالای آن در عفونت به حیوانات یک پاتوژن منتقله از مواد غذایی به خوبی مستند شده است.انسان و همچنین به دلیل ماهیت روان گردان آن تحمل بالایی در برابر گرما، سرما و خشک شدن از خود نشان می دهد.جدا شده از لبنیات تجاری و سایر کارخانه های فرآوری مواد غذایی و در طبیعت در همه جا وجود دارد و در طیف گسترده ای غذاهای فرآوری نشده و در خاک، فاضلاب، سیلو و آب رودخانه وجود دارد.گونه های لیستریا در محدوده pH 4.4-9.6 رشد می کنند و در محصولات غذایی با سطوح pH خارج از این پارامترها زنده می مانند. گونه های لیستریا میکروآئروفیل، گرم مثبت، میله های اسپوروژن، بدون کپسول، غیر منشعب، منظم، کوتاه و متحرک. تحرک بیشتر در ۲۰ درجه سانتیگراد است. نمونه های غذا اغلب به ارگانیسم هایی غیر از لیستریا آلوده می شوند که جداسازی آن را دشوار می کند. برای بازیابی اعداد پایین از L. monocytogenes از نمونه های غذایی، غنی سازی اولیه مورد نیاز است. محیط Listeria Enrichment Broth با افزودنی هایی مورد اصلاح قرار گرفت.استحکام بافر در نتیجه امکان استفاده موفقیت آمیز از محیط در ارتباط با پروب DNA و سایر موارد را فراهم می کند.روش هایی که نسبت به روش های کشت معمولی حساس تر هستند. این محیط همچنین توسط APHA برای غنی سازی انتخابی L. monocytogenes مورد مطالعه قرار گرفت.هیدرولیز آنزیمی کازئین و هضم پاپائیک کنجاله سویا اسیدهای آمینه و سایر مواد نیتروژن دار پیچیده را فراهم می کند.دکستروز منبع انرژی است. سدیم پیروات به زنده ماندن میکروارگانیسم کمک می کند. فسفات ها ظرفیت بافری را فراهم می کنند.کلرید سدیم تعادل اسمزی را حفظ می کند. عصاره مخمر ویتامین B کمپلکس را فراهم می کند.محیط انتخابی به دلیل گنجاندن عوامل ضد میکروبی ارائه شده است.سیکلوهگزیمید رشد قارچ های ساپروفیت را مهار می کند. نالیدیکسیک اسید رشد ارگانیسم های گرم منفی را مهار می کند در حالی که آکریفلاوین رشد میکروارگانیسم های گرم مثبت را سرکوب می کند.با توجه به روش غنی سازی FDAs برای جداسازی L. monocytogenes از محصولات لبنی نمونه باید در آبگوشت غنی شده تلقیح شده و در دمای ۳۰ درجه سانتی گراد به مدت ۴ ساعت بدون مکمل انتخابی انکوبه می شود. بعد از ۴ ساعت مکمل انتخابی اضافه می شود و برای ۴۴ ساعت دیگر در دمای ۳۰ درجه سانتی گراد نگهداری می شود. بعد از ۲۴ ساعت و ۴۸ ساعت کشت غنی شده روی پایه متوسط Oxford Listeria M1145 و LPM Agar M1228 یا Listeria Identification رگه شده است.پایه آگار PALCAM M1064 و در دمای ۳۵ درجه سانتی گراد به مدت ۴۸-۲۴ ساعت انکوبه می شود. کلونی های احتمالی لیستریا انتخاب شده و قسمتهای بیشتر بر روی تریپتون سویا آگار عصاره مخمر M1214 خالص می شوند. سپس کلنی های خالص شده در معرض انواع مختلف آزمایشات بیوشیمیایی برای تایید وجود L. monocytogenes قرار می گیرند.